假阳性是什么原因造成的(抗原检测假阳性是什么原因造成的)

本篇文章给大家谈谈假阳性是什么原因造成的,以及抗原检测假阳性是什么原因造成的对应的知识点,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站喔。 本文目录一览: 1、引物降解后会假阳性...

本篇文章给大家谈谈假阳性是什么原因造成的,以及抗原检测假阳性是什么原因造成的对应的知识点,希望对各位有所帮助,不要忘了收藏本站喔。

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引物降解后会假阳性

引物降解的设计不好会产生非特异造成假阳性。PCR的假阳性主要原因之一出现片状拖带或涂抹带,其对策有:必要时重新设计引物。减低酶量或调换另一来源的酶。降低引物量,适当增加模板量,减少循环次数。适当提高退火温度或采用二温度点法(93度变性,65度左右退火与延伸)。

PCR技术中出现的假阳性和假阴性是啥了?

假阳性是指不含目的片段的模板,经过PCR,批出了与目的模板bp数类似的片段,给人一种含有目的片段的假象.说明是污染造成扩增的。

假阴性是说,你的样品中有目的片段,但由于实验条件不合适,没有P出目的条带,这种情况让人误以为是阴性,所以叫假阴性.说明反应体系中存在抑制物。

阳包假是什么

你是想问什么是假阳性吗?回答如下。

假阳性是指检测结果呈现阳性,但患者状态与阳性结果并不相符。如当早孕试纸出现假阳性时,试纸呈阳性,即两条杠的情况,但是女性并未怀孕。

导致假阳性的原因较多,如果早孕试纸呈现假阳性,可能由于排卵期有黄体生成素的高峰,而黄体生成素跟早孕测的HCG,即人绒毛膜促性腺激素,具有相同的亚单位。所以检测呈现交叉阳性,阳性结果是由于黄体生成素导致,而并非HCG增高导致。另外部分内分泌紊乱疾病,如甲状腺功能异常,或者具有内分泌功能的肿瘤,也会导致假阳性。

TA克隆出现假阳性的原因有哪些?

首先,你的假阳性的定义是什么呢?是板上长了菌落,而且是白色的,但是里面没有插入片段的意思吗?以下是在这个定义基础上进行的讨论。

第一, TA克隆的自身环化是造成这种现象的最主要原因,根据我的经验,不同公司提供的TA载体的自身环化率在20%到50%之间。这个比例可以通过优化连接反应的条件进行改善。无非就是提高反应体系中目的基因片段的含量,通常DNA:TA载体大概应在1:3左右,加入更多片段可以显著提高链接的效率。再就是提高DNA片段的纯度,减少其中的杂质,这需要通过改进DNA凝胶纯化的方法来实现。QIAGEN的凝胶纯化试剂盒非常好。常量高纯度也好。

第二, 除了自身环化之外就是在PCR产物不纯,里面还有引物等小片段,这些东西更容易与TA载体链接,最后进行酶切鉴定时又看不到插入片段。这一般不容易发生,有的人喜欢用柱子纯化PCR产物,我则习惯跑胶后纯化,这样PCR产物和引物等已经完全分离,则不会发生这种情况。

第一点是最主要的,改善链接反应后可以将假阳性的比例降至极低,前段时间我克隆了10个基因,每板挑取4个克隆,其中8个基因的片段插入率都能达到100%。另2两也能达到75%。选用高质量的TA和凝胶纯化试剂盒是关键。推荐QIAGEN的凝胶纯化和PROMEGA的TA克隆。

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